​上海易色医疗科技有限公司

Shanghai Yise Medical Technology Co.,Ltd.

HighMax高效转染试剂（HighMax Transfection Reagent）

使用说明书（版本PC05）

货号

储存条件

​本转染试剂在4℃可保存至少2年。

产品原理

本公司开发的HighMax高效转染试剂，是新一代的DNA转染技术，可用于各种真核细胞系的DNA转染，如HEK293、CHO、COS、NIH3T3等。此外，本试剂也可用于悬浮细胞（如淋巴细胞、昆虫细胞等）的转染。

产品优点

HighMax高效转染试剂，具有如下显著的优势：

1. 转染效率高，可用于绝大部分细胞的转染。

2. 即可用于贴壁细胞的转染，也可用于悬浮细胞的转染。

3. 培养液中的血清和抗生素不会影响转染的效率。

4. 对细胞的毒性极低。

5. 操作简单、重复性好。

6. 本转染试剂非常适合用于腺病毒和慢病毒的包装。

7. 与进口转染试剂相比，价格相对较低，性价比高。

使用方法

1、细胞铺板：

转染前18-24小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在80%左右。

注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。

2 、HighMax-DNA复合物的制备和转染的具体方法：

转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面，以转染35 mm培养皿为例，说明转染的具体方法（如果在别的培养器皿中进行转染，各试剂的使用量见表1）：

（1） 在转染前30-60分钟，将培养液更换成含血清和抗生素的新鲜培养液。

（2） 将1 μg 质粒DNA稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。

（3） 将3 μL HighMax转染试剂稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。

注：不能使用含血清的培养基（包括Opti-MEM）进行DNA和HighMax转染试剂的稀释！因为HighMax-DNA转染复合物的形成过程不能含有血清。

（4） 将稀释好的HighMax转染试剂一次性全部加入到已稀释好的质粒DNA中，立即用移液枪吹吸3-4次。

注：此混合的顺序不能反向进行！

（5） 室温放置10-15分钟，以形成HighMax-DNA复合物。

（6） 将上述100 μL HighMax-DNA转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿，让HighMax-DNA复合物分散均匀。

（7） 转染后12-18小时，去除含HighMax-DNA复合物的培养液，加入含血清和抗生素的新鲜培养液。

（8） 24-48小时后检测转染的效率。

表1. 不同培养器皿中，各试剂的使用量

转染效率

图1. HighMax转染HEK293的效果（GFP），转染效率大约为60-80%。