​上海易色医疗科技有限公司

Shanghai Yise Medical Technology Co.,Ltd.


HighMax高效转染试剂(HighMax Transfection Reagent)

使用说明书(版本PC05)


货号

                                

       产品名称

货号

规格

价格

HighMax高效转染试剂

HT050-1

1 mL

590

HighMax高效转染试剂

HT050-10

10 mL

3900


储存条件

​本转染试剂在4℃可保存至少2年。


产品原理

本公司开发的HighMax高效转染试剂,是新一代的DNA转染技术,可用于各种真核细胞系的DNA转染,如HEK293、CHO、COS、NIH3T3等。此外,本试剂也可用于悬浮细胞(如淋巴细胞、昆虫细胞等)的转染。


产品优点

HighMax高效转染试剂,具有如下显著的优势:

1. 转染效率高,可用于绝大部分细胞的转染。

2. 即可用于贴壁细胞的转染,也可用于悬浮细胞的转染。

3. 培养液中的血清和抗生素不会影响转染的效率。

4. 对细胞的毒性极低。

5. 操作简单、重复性好。

6. 本转染试剂非常适合用于腺病毒和慢病毒的包装。

7. 与进口转染试剂相比,价格相对较低,性价比高。


使用方法

1、细胞铺板:

转染前18-24小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在80%左右。

注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。

2 、HighMax-DNA复合物的制备和转染的具体方法:

转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面,以转染35 mm培养皿为例,说明转染的具体方法(如果在别的培养器皿中进行转染,各试剂的使用量见表1):

(1) 在转染前30-60分钟,将培养液更换成含血清和抗生素的新鲜培养液。

(2) 将1 μg 质粒DNA稀释到50 μL无血清的高糖DMEM,用移液枪吹吸3-4次。

(3) 将3 μL HighMax转染试剂稀释到50 μL无血清的高糖DMEM,用移液枪吹吸3-4次。

注:不能使用含血清的培养基(包括Opti-MEM)进行DNA和HighMax转染试剂的稀释!因为HighMax-DNA转染复合物的形成过程不能含有血清。

(4) 将稀释好的HighMax转染试剂一次性全部加入到已稀释好的质粒DNA中,立即用移液枪吹吸3-4次。

注:此混合的顺序不能反向进行!

(5) 室温放置10-15分钟,以形成HighMax-DNA复合物。

(6) 将上述100 μL HighMax-DNA转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿,让HighMax-DNA复合物分散均匀。

(7) 转染后12-18小时,去除含HighMax-DNA复合物的培养液,加入含血清和抗生素的新鲜培养液。

(8) 24-48小时后检测转染的效率。


表1. 不同培养器皿中,各试剂的使用量

 

培养器皿

培养液体积(mL

DNA量(μg

HighMax (μL)

稀释用无血清量(μL)

48孔板

0.3

0.5

1.5

2 × 25

24孔板

0.5

1

3

2 × 40

12孔板

0.75

1.5

4.5

2 × 60

6孔板

1

3

9

2 × 125

35 mm培养皿

1

3

9

2 × 125

60 mm 培养皿

3

6

18

2 × 250

100 mm 培养皿

9

12

36

2 × 500



转染效率















图1. HighMax转染HEK293的效果(GFP),转染效率大约为60-80%。



转染效率