​上海易色医疗科技有限公司

Shanghai Yise Medical Technology Co.,Ltd.

《双色预染Marker 和自发光Marker套装》

使用说明书（版本PK28）

产品亮点

1. 花费与进口预染蛋白Marker相同的价格，你可以拥有两套完全独立的Marker：

2. 一套《双色预染Marker》，媲美进口同类产品质量。作用：（1）提供粗略的分子量标准；（2）用于监控电泳和转膜过程。

3. 一套《Western Blot专用自发光Marker》。作用：（1）提供精确的分子量标准；（2）用于监控一抗、二抗和ECL过程；（3）目的条带大小ECL后可以直接比较。

4.《双色预染Marker》+《自发光Marker》可谓珠联璧合，全程监控Western Blot所有环节。

货号

产品名称	货号	规格	价格
《双色预染Marker 和自发光Marker套装》	PL202-100	0.5 mL 双色预染Marker (100次) 0.5 mL 自发光Marker (100次)	￥1000
《双色预染Marker》	PS203-100	0.5 mL 双色预染Marker (100次)	￥600
《Western Blot专用自发光Marker》	LU205-100	0.5 mL 自发光Marker (100次)	￥600
《超敏ECL发光液》	SE206-10	10 mL	￥100
《超敏ECL发光液》	SE206-500	500 mL	￥2000

储存条件

本产品在-20 ℃可保存至少3年。

产品原理

《双色预染Marker》通过将纯化的蛋白与染料进行化学修饰后得到，可以为Western Blot提供粗略的分子量标准，也可用于监控电泳和转膜过程。

《Western Blot专用自发光Marker》含有6个纯化的蛋白质，均含有可被小鼠、兔子和山羊等各类抗体识别的基团，当进行化学发光（ECL）检测时，6个蛋白质由于结合了相应的抗体，也可以发光，从而达到自发光的效果。自发光Marker发出的光与目的蛋白质条带发的光一样，可以通过X-光胶片曝光或者ECL发光成像仪进行检测。《自发光Marker》可以为Western Blot提供精确的分子量标准（注：6个蛋白质中的5个都经过质谱的鉴定），也可用于监控一抗、二抗和ECL过程。

产品组成

《双色预染Marker》：500 μL，含8个预染的蛋白质，分子量从15 – 135 kDa。

《自发光Marker》：500 μL，含6个可自发光的蛋白质，分子量从23 – 117 kDa。

产品优点

《双色预染Marker 和自发光Marker套装》具有如下显著的优势：

1. 花费与进口预染蛋白Marker相同的价格，你可以拥有两套完全独立的Marker。

2. 一套《双色预染Marker》，媲美进口同类产品质量，提供粗略的分子量标准，用于监控电泳和转膜过程。

3. 一套《Western Blot专用自发光Marker》，提供精确的分子量标准（注：6个蛋白质中的5个都经过质谱的鉴定，为精确分子量），用于监控一抗、二抗和ECL过程，而且目的条带大小ECL后可以直接比较。

注：传统预染蛋白质Marker的由于经过了化学修饰的过程，其分子量是不精确的，其误差有可能达到好几个kDa，而自发光Marker由于没有经过化学染色的过程，其分子量是精确的。

4. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》同时使用，可谓珠联璧合，全程监控Western Blot所有环节。

5. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》都是Ready-to-use产品，可以直接使用。

使用方法

1. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》室温融化后均可在SDS-PAGE胶中直接上样。

2. 《双色预染Marker》直接上5 μL即可，上样量一般不必改变。

注：（1）《双色预染Marker》中的70 kDa条带为红色，其他条带为蓝色；（2）《双色预染Marker》上样量过大时，可能在36 kDa和51 kDa之间有一条非常微弱的杂带。

3. 《自发光Marker》的使用量，一般上5 μL即可。如有必要，也可根据您使用胶的厚度、上样孔的宽度、一抗和二抗的种类、滴度以及ECL液的灵敏度等相关因素进行适当的调整，一般在2-10 μL之间。

注：（1）ECL液建议使用本公司的《超敏ECL发光液》，使用该ECL液，《自发光Marker》的使用量2 μL就足够。经比较测试：本公司的《超敏ECL发光液》在灵敏度和发光的稳定性方面都比目前市面上大量使用的Millipore ECL液（货号：WBKLS0500）更灵敏和更稳定，价格却更便宜，还可以大大节省自发光Marker和一抗、二抗的用量。详情请见本公司《超敏ECL发光液》说明书。（2）《自发光Marker》上样量过大时可能会有微弱的杂带，可以通过减少上样量来解决。

4. 《双色预染Marker》和《自发光Marker》可以根据您的喜好，即可以分开来上样，也可以在同一个泳道上两种Marker。

注： 同一个泳道上两种Marker时，最好先将两种Marker在离心管中匀混后，再上样，如此操作，Marker的条带会更漂亮。

5.  转膜后，进行正常的封闭、一抗和二抗孵育，最后进行ECL发光检测。

6.  ECL后，可以同时检测到6个自发光条带和目的条带（如图1B所示）。目的条带的大小一目了然。

产品效果

图1. 《双色预染Marker 和自发光Marker套装》实验效果图。（A）《双色预染Marker》经电泳并转膜后的效果图。（B）《自发光Marker》经ECL后的效果图。（C）《双色预染Marker》和《自发光Marker》合并后的彩色效果图。（D）《双色预染Marker》和《自发光Marker》合并后的黑白效果图。实验条件：12% SDS-PAGE胶，一抗为小鼠Anti-Actin抗体，二抗为HRP标记的山羊抗小鼠抗体。泳道1：双色预染Marker； 泳道2：自发光Marker；泳道3：细胞裂解样品。注：《自发光Marker》中的117.52 kDa条带未经质谱鉴定，为理论分子量，别的5个条带均已经过质谱鉴定，为实际分子量。

附录（二）本公司《双色预染Marker》与进口同类产品对比图

图3. 《双色预染Marker》与进口同类产品对比图。泳道1: 本公司《双色预染Marker》（货号： PS203）；泳道2: Thermo公司《预染Marker》（货号：26616）。可见，二者的质量完全相当。