​上海易色医疗科技有限公司

Shanghai Yise Medical Technology Co.,Ltd.


《双色预染Marker 和自发光Marker套装》

使用说明书(版本PK28)


产品亮点

1. 花费与进口预染蛋白Marker相同的价格,你可以拥有两套完全独立的Marker:

2. 一套《双色预染Marker》,媲美进口同类产品质量。作用:(1)提供粗略的分子量标准;(2)用于监控电泳和转膜过程。

3. 一套《Western Blot专用自发光Marker》。作用:(1)提供精确的分子量标准;(2)用于监控一抗、二抗和ECL过程;(3)目的条带大小ECL后可以直接比较。

4.《双色预染Marker》+《自发光Marker》可谓珠联璧合,全程监控Western Blot所有环节。


货号


       产品名称

货号

规格

价格

《双色预染Marker 和自发光Marker套装》

PL202-100

0.5 mL 双色预染Marker (100)

0.5 mL 自发光Marker (100)

¥750

《双色预染Marker 和自发光Marker装》

PL202-500

5x0.5 mL 双色预染Marker (500)

5x0.5 mL 自发光Marker (500)

¥3200

《双色预染Marker

PS203-100

0.5 mL 双色预染Marker (100)

¥400

《双色预染Marker

PS203-500

5x0.5 mL 双色预染Marker (500)

¥1800

Western Blot专用自发光Marker

LU205-100

0.5 mL 自发光Marker (100)

¥400

Western Blot专用自发光Marker

LU205-500

5x0.5 mL自发光Marker (500)

1800

《超敏ECL发光液》

SE206-10

10 mL

100

《超敏ECL发光液》

SE206-500

500 mL

¥2000




储存条件

本产品在-20 ℃可保存至少3年。


产品原理

《双色预染Marker》通过将纯化的蛋白与染料进行化学修饰后得到,可以为Western Blot提供粗略的分子量标准,也可用于监控电泳和转膜过程。

《Western Blot专用自发光Marker》含有6个纯化的蛋白质,均含有可被小鼠、兔子和山羊等各类抗体识别的基团,当进行化学发光(ECL)检测时,6个蛋白质由于结合了相应的抗体,也可以发光,从而达到自发光的效果。自发光Marker发出的光与目的蛋白质条带发的光一样,可以通过X-光胶片曝光或者ECL发光成像仪进行检测。《自发光Marker》可以为Western Blot提供精确的分子量标准(注:6个蛋白质中的5个都经过质谱的鉴定),也可用于监控一抗、二抗和ECL过程。


产品组成

《双色预染Marker》:500 μL,含8个预染的蛋白质,分子量从15 – 135 kDa。

《自发光Marker》:500 μL,含6个可自发光的蛋白质,分子量从23 – 117 kDa。


产品优点

《双色预染Marker 和自发光Marker套装》具有如下显著的优势:

1. 花费与进口预染蛋白Marker相同的价格,你可以拥有两套完全独立的Marker。

2. 一套《双色预染Marker》,媲美进口同类产品质量,提供粗略的分子量标准,用于监控电泳和转膜过程。

3. 一套《Western Blot专用自发光Marker》,提供精确的分子量标准(注:6个蛋白质中的5个都经过质谱的鉴定,为精确分子量),用于监控一抗、二抗和ECL过程,而且目的条带大小ECL后可以直接比较。

注:传统预染蛋白质Marker的由于经过了化学修饰的过程,其分子量是不精确的,其误差有可能达到好几个kDa,而自发光Marker由于没有经过化学染色的过程,其分子量是精确的。

4. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》同时使用,可谓珠联璧合,全程监控Western Blot所有环节。

5. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》都是Ready-to-use产品,可以直接使用。


使用方法

1. 《双色预染Marker》与《自发光Marker》室温融化后均可在SDS-PAGE胶中直接上样。

2. 《双色预染Marker》直接上5 μL即可,上样量一般不必改变。

​注:(1)《双色预染Marker》中的70 kDa条带为红色,其他条带为蓝色;(2)《双色预染Marker》上样量过大时,可能在36 kDa和51 kDa之间有一条非常微弱的杂带。

3. 《自发光Marker》的使用量,一般上5 μL即可。如有必要,也可根据您使用胶的厚度、上样孔的宽度、一抗和二抗的种类、滴度以及ECL液的灵敏度等相关因素进行适当的调整,一般在2-10 μL之间。

注:(1)ECL液建议使用本公司的《超敏ECL发光液》,使用该ECL液,《自发光Marker》的使用量2 μL就足够。经比较测试:本公司的《超敏ECL发光液》在灵敏度和发光的稳定性方面都比目前市面上大量使用的Millipore ECL液(货号:WBKLS0500)更灵敏和更稳定,价格却更便宜,还可以大大节省自发光Marker和一抗、二抗的用量。详情请见本公司《超敏ECL发光液》说明书。(2)《自发光Marker》上样量过大时可能会有微弱的杂带,可以通过减少上样量来解决。

4. 《双色预染Marker》和《自发光Marker》可以根据您的喜好,即可以分开来上样,也可以在同一个泳道上两种Marker。

注: 同一个泳道上两种Marker时,最好先将两种Marker在离心管中匀混后,再上样,如此操作,Marker的条带会更漂亮。

5.  转膜后,进行正常的封闭、一抗和二抗孵育,最后进行ECL发光检测。

6.  ECL后,可以同时检测到6个自发光条带和目的条带(如图1B所示)。目的条带的大小一目了然。



产品效果


























图1. 《双色预染Marker 和自发光Marker套装》实验效果图。(A)《双色预染Marker》经电泳并转膜后的效果图。(B)《自发光Marker》经ECL后的效果图。(C)《双色预染Marker》和《自发光Marker》合并后的彩色效果图。(D)《双色预染Marker》和《自发光Marker》合并后的黑白效果图。实验条件:12% SDS-PAGE胶,一抗为小鼠Anti-Actin抗体,二抗为HRP标记的山羊抗小鼠抗体。泳道1:双色预染Marker; 泳道2:自发光Marker;泳道3:细胞裂解样品。注:《自发光Marker》中的117.52 kDa条带未经质谱鉴定,为理论分子量,别的5个条带均已经过质谱鉴定,为实际分子量。


附录(一)《自发光Marker》质谱图

























图2. 《自发光Marker》质谱图。《自发光Marker》中的117.52 kDa条带未经质谱鉴定,为理论分子量,别的5个条带均已经过质谱鉴定,为实际分子量。本图为5个蛋白质的质谱图。




附录(二)本公司《双色预染Marker》与进口同类产品对比图

















图3. 《双色预染Marker》与进口同类产品对比图。泳道1: 本公司《双色预染Marker》(货号: PS203);泳道2: Thermo公司《预染Marker》(货号:26616)。可见,二者的质量完全相当。




附录(三)本公司《超敏ECL发光液》与进口同类产品对比图
















图4. 本公司《超敏ECL发光液》与进口同类产品对比图。(A)直接将ECL液与HRP酶反应后的发光值。可见,与进口的Millipore ECL液(货号:WBKLS0500)相比,本公司《超敏ECL发光液》无论在绝对发光值方面还是在发光的稳定性方面都具有明显的优势。(B)通过Western Blot实验,测试两种ECL液的实际效果。可见,本公司《超敏ECL发光液》明显灵敏很多。