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《超级DNA上样缓冲液》使用说明书（版本20201110）

(Super DNA Loading Buffer, 5 ×，AgarOrange)

产品亮点

琼脂糖DNA电泳再也不需要EB（溴化乙锭）染色了! 从此与这种强致癌物说再见。

货号

注：使用本产品，一个PCR产物样品或者酶切产物样品只需不到0.2元人民币。

储存条件

本产品在-20 ℃可保存至少5年，4 ℃至少1年。

产品原理

超级DNA上样缓冲液(AgarOrange)， 是将核酸染料AgarOrange与琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液混合而成。

AgarOrange是著名核酸染料GelRed的类似物，与GelRed具有非常相似的化学结构，是GelRed的升级产品，其具有GelRed所有的优异特性，主要包括：低毒、低致癌性、核酸染色灵敏度高、高稳定性等。

此外，与GelRed相比，AgarOrange具有一个非常显著的优点：其可以直接与DNA上样缓冲液预先混合，进行DNA琼脂糖凝胶电泳时，无需在凝胶中预先加入任何染料，也无需进行电泳后的凝胶染色。简化了实验步骤，大幅降低了实验成本（大约是GelRed凝胶染色价格的1/10左右），同时节省了不少时间。

产品优点

超级DNA上样缓冲液(AgarOrange)，具有如下显著的优势：

1.  非EB（溴化乙锭）核酸染料。
2.  低毒、低致癌性。这是因为AgarOrange具有与GelRed非常相似的独特化学结构，使其难以穿透细胞膜，从而大幅提升了其生物安全性。

   注：如果大家对此结论有疑问，欢迎广大客户亲自做对比实验，可以将1 × AgarOrange染料、1 × EB染料和1 × SYBR green I分别加入到细胞，孵育30分钟后，在荧光显微镜下，观察各自细胞核的染色情况。

3.  由于超级DNA上样缓冲液(AgarOrange)已经含有AgarOrange核酸染料，琼脂糖凝胶中无需预先加入任何染料，也无需进行电泳后的染色。简化了实验步骤，大幅降低了实验成本，同时节省了不少时间。

   使用方法

1. 琼脂糖凝胶的配制：配制琼脂糖凝胶时，无需加入任何核酸染料（比如EB, SYBR green I、GelRed等）。
2.  取8 μL PCR产物或者酶切产物，加入2 μL 超级DNA上样缓冲液(5×，AgarOrange)，混匀后，即可进行上样。

注：配套的DNA marker可以使用：（1）本身不含Loading Buffer的DNA marker，比如Thermo公司的 GeneRuler 100 bp DNA ladder（货号：SM0241或SM0242）或者GeneRuler 1 kb DNA ladder（货号：SM031或SM0312），按照其说明书加入水和相应体积的超级琼脂糖电泳上样缓冲液(5×，AgarOrange)后即可使用；（2）如果购买的DNA marker本身已经含有Loading Buffer，可以按如下配制后使用：比如购买的DNA marker（含Loading Buffer）体积为500 μL，补加入400 μL水和100 μL超级琼脂糖电泳上样缓冲液(5×，AgarOrange)，最终体积为1000 μL。配好后，电泳时DNA marker的加入量翻倍使用。即如果DNA marker原来使用5 μL，补加入水和超级琼脂糖电泳上样缓冲液后，使用10 μL。

3. 琼​脂糖凝胶电泳后，可直接进行紫外拍照。

产品效果

图1. 琼脂糖凝胶电泳核酸染色效果。左图为：EB（溴化乙锭）的染色效果，右侧为：超级DNA上样缓冲液(AgarOrange)的染色效果。可见：AgarOrange的核酸染色效果比EB明亮、清晰。